本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱(chēng)】: 核型多角體病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
【英文名稱(chēng)】: Nuclear Polyhedrosis Virus(NPV)PCR
【貨號(hào)】: BKP4106
【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集：各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運(yùn)輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。

組成及試劑配制

酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。

核型多角體病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (His 標(biāo)簽)MOPSFREEACIDMOPS蛋白組學(xué)級(jí)白色精細(xì)結(jié)晶粉末RTsigma

HS 683(人腦細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 生孢梭菌1,3-;1,3-二羌基丁烷 1,3-Butcnqdiol;1,3-Butylqnq glycol;1,3-Dixy7noxybutcnq;β-Butylqnq glycol;MqthyltriMqthylqnq glycol 107-88-0

滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)肖醋亞工 MqRCUROUS nitncTq 778-86-7

CNDP2 Others Mouse 小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甲泛影酰，英文名或英文縮寫(xiě)：Metrizamide，級(jí)別：優(yōu)質(zhì)級(jí)，規(guī)格：1毫克

人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;DaoyDL-色酸;DL-胰化蛋白基酸;DL-色基酸;DL-2-基-3-吲哚基-1-酸;DL-基吲哚酸DL-Tryptophan ;DL-2-AMino-3-indolepropionic acid;DL-2-AMino-3-indolylpro-panoic acid;DL-β-3-Indolyl alanine;(±)-2-AMino-3-(3-indolyl)propionic acid
ANGPT4 Others Human 人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 吲哚布芬（標(biāo)準(zhǔn)品）Indobufen質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

人內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸曲普利啶（標(biāo)準(zhǔn)品）Triprolidine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

HS-1細(xì)胞，人細(xì)胞系 滑念珠菌 小鼠細(xì)胞(B類(lèi));Pan02米力農(nóng)(標(biāo)準(zhǔn)品)Milrinone質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

CCL20 Protein Human 重組人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 標(biāo)簽)壬二酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Azelaic acid質(zhì)量規(guī)格：檢查

MDCK(犬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CRELD2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 培哚普利雜質(zhì)S9780（培哚普利拉）（標(biāo)準(zhǔn)品）Perindoprilat質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用
核型多角體病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 醋酸恩夫韋地 Enfuvirtide Acetate質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%

小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;3T3-Swiss albinoD-海藻糖無(wú)水D-(+)-Trehalose Anhydrous質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BR

tTA基因修飾的小鼠(B類(lèi));P19-CAG-tTA-1F3 彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL二醋酸戈那瑞林(LH-RH)Gonadorelin Acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%,二醋酸鹽

A549, 人細(xì)胞系 Human醋酸戈舍瑞林 Goserelin Acetate質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%

NETO1 Others Human 人 NETO1 / BTCL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 醋酸亮丙瑞林 Leuprolide Acetate質(zhì)量規(guī)格：BR,>98%
非洲綠猴腎細(xì)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-DL-2-(2-Chloropxenyl)glycineDL-2-錄本甘酸100克BR，98%

NCI-H1650細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,RM-1細(xì)胞 CM-R031大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL2′-脫氧肌苷 2′-Deoxyinosine,≥98% 890-38-0 100MG 通用試劑

Raji(人Butt's瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2六亞基亞安98%(劇讀) Hqxcmqthylqnqiminq

Promocell C-28050 DC Generation Medium, 樹(shù)突狀細(xì)胞生成培養(yǎng)基(即用型) 250ml1，4-pxenylenediaminedixy7nochloride鹽酸對(duì)本500克超，99%

人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)Abscisicacid 25mg/50mg/250mg原裝 Aldrich 862169

PCR檢測(cè)試劑盒：

核型多角體病毒PCR檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū) (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書(shū)的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見(jiàn)白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。