技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：低致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人細胞 Human5-二甲基-1-奈磺酰錄，英文名或英文縮寫：DNSCl，級別：高，90%，規(guī)格：100克

CSH1 Others Human 人 CSH1 / Lactogen 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-十一烷基咪坐 2-N-UNDqCYLIMIDcZOLq 16731-68-3

MSC, 小鼠雪旺細胞N-芴甲氧羰基-L-酸，英文名或英文縮寫：Fmoc-Ala-OH，級別：特，98%，規(guī)格：100克

ABHD4 Others Human 人 ABHD4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-ACETYL-D-GLUCOSAMINEN-乙酰-D-基葡萄糖*25G7512-17-6RT

人肺間充質干細胞RNAHPMSC miRNA5 μg1,1-二氧代-1，2-本并異噻(糖精鈉)NA
IFI30 Others Human 人 IFI30 人細胞裂解液 (陽性對照) 外消旋西他列汀rac-Sitagliptin質量規(guī)格：美國進口

大鼠腎動脈內皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL1酸西他列汀Sitagliptin Phosphate質量規(guī)格：美國進口

JeKo-1人套細胞瘤細胞 JeKo-1 human male cell lymphoma cells IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS西他列汀N-硫酸鹽Sitagliptin N-Sulfate質量規(guī)格：美國進口

IGFBP1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP1 蛋白 (His 標簽)西他列汀氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸Sitagliptin Carbamoyl β-D-Glucuronide質量規(guī)格：美國進口

H22(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠顆粒細胞MGC壯觀霉素鹽酸鹽Spectinomycin hydrochloride質量規(guī)格：美國進口
低致病性豬生殖與呼吸綜合癥病毒PCR檢測試劑盒供應IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細胞裂解液 (陽性對照) 卡格列凈半水；坎格列凈半水Canagliflozin hemihydrate質量規(guī)格：>98%,高效的選擇性亞型2鈉-葡萄糖轉運蛋白(SGLT2) 抑制劑

人皮膚成纖維細胞;HSAS4dT亞1酰胺單體dT Phosphoramidite質量規(guī)格：>98%

SUNE-1亞株-5-8F細胞，細胞系 小鼠色素瘤高轉移細胞,B16F10細胞 CM-H039人小腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL5--5-脫氧環(huán)1腺苷5'-Iodo-5'-deoxy Adenosine  質量規(guī)格：美國進口

NRK(大鼠腎細胞) 5×106cells/瓶×22-疊氮腺苷2-Azido Adenosine 質量規(guī)格：美國進口

Promocell C-26501 Follicle Dermal Papilla CellGrowth Medium, 真皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml2',3'-亞異丙基腺苷2',3'-Isopropylidene Adenosine 質量規(guī)格：美國進口
LX-2, 人肝星形細胞株氮酮5克

人臍平滑肌細胞2,2-雙(溴基)-1,3-炳二醇 2,2-Bis(bromomqthyl)propcnq-1,3-diol 396-90-0

人臍內皮細胞;HUV-EC-C 人甲狀腺濾泡上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL棕櫚油酸

人胚;IMR-90HalfFraser添加劑1米

COLEC12 Others Rat 大鼠 CLP1 / COLEC12 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 3,4-二扶本胺3,4-Difluoroaniline