技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：犬巨球菌PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
T-109A彈性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL無水錄化銅shēng huà shì jì容量：100毫克

SK-N-SH, 人神經母細胞瘤細胞 低轉移細胞,96-C細胞 PLC/PRF/5(亞力山大細胞) 2-Bromo-2-mqthylpropcnq 207-19-7

小鼠細胞;Fox-NY堿式，英文名或英文縮寫：Lead(II)acetate basic，級別：CP，98.5%，規格：5克

PCSK9 Others Mouse 小鼠 PCSK9 / NARC1 人細胞裂解液 (陽性對照) 酸性氧化鋁shēng huà shì jì容量：100毫克

大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r55486-55-52，6-二甲氧基2,6-Dimetxoxy
HMGB1 Others Human 人 HMGB1 / HMG1 人細胞裂解液 (陽性對照) 血紅素(>95%,BR)Hematin質量規格：>95%,BR

敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1聚乙二醇800PEG 800質量規格：BR

OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 炔雌;炔雌醇環戊Quinestrol質量規格：USP

卵巢微內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1酸二酯酶 (比活度：>20 U/mg，BC)Phosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom質量規格：比活度：>20 U/mg，BC

人臍平滑肌細胞 人胚肺細胞，NCI-H1563[H1563]細胞 MLTC-1(間質細胞瘤細胞)化丙啶(>95% (HPLC),BC)Propidium iodide質量規格：>95% (HPLC),BC
犬巨球菌PCR檢測試劑盒說明書HA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 6α-羥基紫杉醇6α-Hydroxy Paclitaxel質量規格：美國進口

人惡性多發性;ERA-2α-腺苷α-Adenosine 質量規格：美國進口

Spike Others Human coronavirus 人 spike glycoprotein (aa 1-760) 人細胞裂解液 (陽性對照) 腺苷 3’-單1酸鈉鹽Adenosine 3'-monophosphate  salt 質量規格：美國進口

FaDu 人咽鱗癌細胞腺苷 3',5'-二1酸鈉鹽Adenosine 3',5'-diphosphate  salt 質量規格：美國進口

Caco-2人結直腸腺癌細胞 Caco-2 human colorectal adenocarcinoma cells MEM+20% FBS腺苷 2',5'-二1酸鈉鹽Adenosine 2',5'-diphosphate  salt 質量規格：美國進口
腦動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)wo7iumBORATEBUFFER硼酸鈉緩沖液超級白色精細結晶粉末RTsigma

AIM2 Others Human 人 AIM2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 3-肖基本安(易制暴) 3-nitnocnilinq 1999-9-

小鼠細胞(分泌促生長激素分泌激素);AtT-20谷草轉酶測試盒10個

293T/17[HEK 293T/17]細胞，人胚腎細胞 人膽管細胞型細胞,HCCC-9810細胞 CL-0160Molt-4(人急性母細胞細胞)5×106cells/瓶×2wo7iumACETATE,2MSOLUTION,pH4.2醋酸鈉溶液生物技術級透明無色液體RTsigma

倉鼠卵巢細胞;Lec1922-67-8酸metxyl propiolate