技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：馬立克氏病病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1Ammoniummolybdatetetrahydrate四水合鉬酸1克BR，98%

CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,2,4-本三加醋 1,2,4-Bqnzqnqtriccrboxylic ccid 28-44-9

HGC-27 人細胞(未分化)礦物油 Minqrcl Oil 804-47-2

HuT 78人T細胞細胞 HuT 78 human T lymphocyte leukemia cell IMDM培養基+20%FBS4-nitnopxenol對硝基酚5克BS，85%

VEGFA Protein Human 重組人 VEGF121b / VEGF-A 蛋白GDX　104(聚二本多孔小球)NA
HCT-8 [HRT-18]人回盲細胞 HCT-8 [HRT-18] human ileocecal carcinoma cells 1640+10% FBS鹽酸硫必利（標準品）Tiapride hydrochloride質量規格：UV法含量測定

IFNG Protein Rat 重組大鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (Fc 標簽)甲基橙皮甙Methyl hesperidin質量規格：≥95%

MC3T3-E1 Subclone 14(小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14) 5×106cells/瓶×2 CHO(中國倉鼠卵巢細胞)嗎多明Molsidomine質量規格：>98%,BR

原代骨細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml嗎多明（標準品）Molsidomine質量規格：含量測定

RK2 Others Canine 狗 kB / RK2 人細胞裂解液 (陽性對照) O,P-滴滴滴(標準品)Mitotane;O,P'-DDD質量規格：含量測定
馬立克氏病病毒PCR檢測試劑盒供應人細胞;CNE-2Z 大鼠腎上皮細胞完全培養基 100mL十一1酸鋅Zinc undecylenate質量規格：>98%

NG108-15 大鼠小鼠雜合神經細胞氨甲酰甲膽堿；氯貝膽堿Carbamyl-β-methylcholine chloride 質量規格：>99%,美國進口

IL2RA Others Mouse 小鼠 IL2RA / CD25 人細胞裂解液 (陽性對照) 茄尼醇（標準品）Solanesol質量規格：HPLC≥97%，標準品

人;Calu-3大波斯菊苷,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準品)Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside質量規格：HPLC≥98%,標準品

PRLR Others Rat 大鼠 PRLR / Prolactin receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 秦皮苷（標準品）Fraxin質量規格：HPLC≥98%，標準品
L6565細胞，小鼠克隆細胞系 破桿菌/梭菌Closidium tetani 猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞;RF/6A4-硝基芘(>97.0%(HPLC))質量規格：>97.0%(HPLC)4-Nitropyrene

CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a, His 標簽)2-氨基芴(>97.0%(T))質量規格：>97.0%(T)2-Aminofluorene

PIEC(豬髖動脈內皮細胞 ) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD10 / Neprilysin / MME 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-氨基-9-芴酮(>98.0%(HPLC))質量規格：>98.0%(HPLC)2-Amino-9-fluorenone

人細胞;Hela P10s-11F2-氨基-9,9-二甲基芴(>98.0%(HPLC)(T))質量規格：>98.0%(HPLC)(T)2-Amino-9,9-dimethylfluorene

CD81 Others Human 人 CD81 / TAPA-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-代戊炔(>97.0%(GC))質量規格：>97.0%(GC)1-Pentynyl Iodide