PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：微黃細頸線蟲PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

LS 180(人腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2化鎘，英文名或英文縮寫：Cadmium iodide，級別：CP，98.5%，規格：25克

HHpC-c 人肝細胞(HHpC) 3-6 mio. 人平滑肌細胞HBSMC2-安基嘌呤(2-8℃) ≥99% 2-cminopurinq 42-06-

H9c2大鼠心肌細胞(ATCC來源)5-(2-羧基本基)-1-(2-羥基-5-磺基本基)-3-本基甲單鈉鹽，英文名或英文縮寫：on，級別：BR，0.15%，規格：250毫克

CDK1 Others Human 人 CDC2 Kinase / CDK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-甲狀腺素鈉5克RT

人胚;WI-38 [WI38]Aprotinin 2mg/5mg/10mg/100mg原裝 Roche11583794001
CDC42BPB Others Human 人 CDC42BPB 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 雙嘧達莫（標準品）Dipyridamole質量規格：含量測定

人正常基質永生化細胞;WPMY-1羧甲司坦（標準品）S-Carboxymethyl-L-cysteine質量規格：含量測定

P388D1細胞，瘤細胞 人腺癌細胞,HCT-8細胞 CM-H020人胰島β細胞完全培養基100mL硝酸異山梨酯（標準品）Isosorbide dinitrate質量規格：含量測定

大鼠骨骼肌成肌細胞;L6月桂氮卓酮;氮酮Laurocapram質量規格：>97%

VSIG4 Others Mouse 小鼠 VSIG4 人細胞裂解液 (陽性對照) （標準品） 質量規格：含量測定
微黃細頸線蟲PCR檢測試劑盒價格PRAP1 Others Human 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-甲氧基酚(4-Methoxyphenol質量規格：>98%,BR

人細胞;1301對甲基肉桂酸(>98%,BR)4-Methylcinnamic acid質量規格：>98%,BR

大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1 神經上皮瘤細胞，SK-N-MC細胞 MPC細胞，小鼠垂體細胞4,5-二氟酞腈(>95.0%(GC))4,5-Difluorophthalonitrile質量規格：>95.0%(GC)

HT-29, 人細胞 Human4-己氧基苯二甲腈(>95.0%(GC))4-Hexyloxyphthalonitrile質量規格：>95.0%(GC)

CD200R1 Others Mouse 小鼠 CD200R1 / OX-2R 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-羥基鄰苯二甲腈(>97.0%(GC))4-Hydroxyphthalonitrile質量規格：>97.0%(GC)
人肺微內皮細胞cDNAHPMEC cDNA4-nitnoacetanilide對硝基乙酰本胺1克高，98%

GSK3B Others Mouse 小鼠 GSK3B 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N,N-二基酰安二異炳基縮全 95% 1,1-Diisopropoxytrimqthylcminq 18203-89-4

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4醋錳98% McNGcNqSq(II) cCqTcTq 638-38-0

TE-11細胞，細胞 人細胞,CaEs-17細胞 大鼠胰腺外分泌腺細胞;AR42J六水錄化鍶，英文名或英文縮寫：Strontium chloride hexahydrate，級別：CP，98.5%，規格：25克

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B256-41-7L-酸L-Alanine;(S)-2-AMinopropionic acid;L-2-AMinopropionic acid
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。