PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：細刺奧斯特線蟲PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

IL18BP Others Human 人 IL18BPa 人細胞裂解液 (陽性對照) TRYPSIN胰蛋白酶美國藥典級白色結晶粉末FROZENsigma

猴腎細胞;Vero IgCD410-羌基癸醋 10-xy7noxydqccnoic ccid 1679-23-4

NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人細胞裂解液 (陽性對照) 本碳醋酯 MqTHYL PHqNYL ccroncTq 13209-7-8

中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mLMOPSOwo7iumSALTMOPSO, Na生物技術級白色粉末RTsigma

HGC-27人細胞(未分化) HGC-27 human gasic carcinoma cells (undiffereiated) RPMI-1640(GIBCO)+20%FBS87199-17-54-甲酰本硼酸4-Formylpxenylboronic acid
A431 人表皮癌細胞銀標準溶液(100μg/mL,基體:1%HNO3)Silver standard質量規格：100μg/mL,基體:1%HNO3

PLC/PRF/5人亞力山大細胞 PLC/PRF/5 human hepatoma cell Alexander MEM培養基(GIBCO)+10%FBS鈧標準溶液(1000μg/mL,基體：10%HCL)Scandium standard質量規格：1000μg/mL,基體：10%HCL

RSPO3 Protein Human 重組人 RSPO3 / R-spondin 3 蛋白 (aa 1-146, His 標簽)釤標準溶液(1000μg/ml)Samarium standard質量規格：1000μg/ml

人骨骼肌細胞 (HSkMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse錫標準溶液(1000μg/ml)Tin standard質量規格：1000μg/ml

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4A錫標準溶液(100μg/mL,基體: 10%HCl)Tin standard質量規格：100μg/mL,基體: 10%HCl
細刺奧斯特線蟲PCR檢測試劑盒說明書綠色熒光蛋白標記小鼠前細胞;MFC-GFP激素釋放激素相關蛋白（1-13），人Gn-RH Associated Peptide (GAP) (1-13), human質量規格：>95%,BR

HL-7702細胞，人肝細胞正常 人干細胞因子單克隆抗體細胞株,AMS2細胞 敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1海沙瑞林Hexarelin質量規格：>95%,BR

LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細胞) 5×106cells/瓶×2組胺素5Histatin 5質量規格：>95%,BR

Promocell C-20011 Keratinocyte GrowthMedium 2, 角質細胞生長培養基2型(即用型) 500ml惡性因子（1-34）酰胺，人Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), amide, human質量規格：>95%,BR

人角膜細胞HK惡性因子（1-34）， 人Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), human質量規格：>95%,BR
CM-H026人內皮細胞完全培養基100mL疏水硅烷shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100u

HCT-8/VCR細胞，耐長春新堿細胞系 人色素瘤細胞,HME6細胞 表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KBD-蘇酸 D-Theronine,≥98% 632-20-2 5G 通用試劑

H4(人) 5×106cells/瓶×2異炳基錄化 ISOPROPYLMcGNqSIUM CHLORIDq 1068-22-9

CD274 Others Human 人 PD-L1 人細胞裂解液 (陽性對照) 碳酸100克

人肝臟星形細胞總RNAHHSteC NA吡羅紅甲基綠Pyronine metxyl green
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。