PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：綿羊腺病毒PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

T-108A膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL愈創木酚，英文名或英文縮寫：2- metxoxypxenol，級別：CP，99%，規格：250毫克

EGFR Others Mouse 小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 人細胞裂解液 (陽性對照) 比卡魯安 BicclutcMidq 90327-06-2

小鼠子宮成纖維細胞完全培養基 100mLγ-亞麻酸，英文名或英文縮寫：γ-Linolenic acid metxyl ester，級別：AR，99.5%，規格：1公斤

F9小鼠 F9 mouse teratoma cells DMEM培養基+10%FBS胰胨大豆胨固綠瓊脂shēng huà shì jì容量：100毫升

IL10 Protein Human 重組人 IL10 / Ierleukin-10 蛋白 (His 標簽)(牛肉蛋白胨)
22RV1細胞，細胞 人細胞,Bel-7405細胞 CL-0024Anglne(人細胞)5×106cells/瓶×2柏醇Coniferyl alcohol質量規格：>98%,sigma223735

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1乙酰輔酶A鈉鹽Acetyl coenzyme A  salt  質量規格：≥93%,美國進口

IL1RAPL1 Others Human 人 IL1R8 人細胞裂解液 (陽性對照) 肌苷酸二鈉Di 5'-Inosinate質量規格：>98%,BR

細胞衰老檢測試劑盒CSA環索奈德Ciclesonide質量規格：>99%,BR

ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照) 環索奈德(標準品)Ciclesonide質量規格：>99%,標準品
綿羊腺病毒PCR檢測試劑盒直銷T/G細胞，人平滑肌細胞 KM小鼠網織細胞瘤株,LⅡ細胞 人真皮成纖維細胞-胎兒裂解物HDF-f L(2S)-2-N-芴甲氧羰基氨基-2-甲基-6-庚1酸(S)-N-Fmoc-2-(4'-pentenyl)alanine質量規格：>97%

NEC(人細胞) 5×106cells/瓶×2潑尼龍1酸鈉Prednisolone phosphate 質量規格：>97%,USP

Caki-1(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0046C4-2(人細胞)5×106cells/瓶×2 小鼠單核巨噬細胞;J774A.1ABD-F[=4-(氨磺酰)-7-氟-2,1,3-苯并惡二唑](>98.0%(N)(T))ABD-F [=4-(Aminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]質量規格：>98.0%(N)(T)

綿羊皮膚細胞;OAR-S1二茂鐵乙酸(>97.0%(GC))Ferroceneacetic Acid質量規格：>97.0%(GC)

IL13RA2 Others Canine 狗 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照) (肼基羰基)二茂鐵(>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標記)(Hydrazinocarbonyl)ferrocene質量規格：>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標記
HA Others H2N2 甲型 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) D(+)GALACTOSED-半乳糖*白色結晶粉末RTsigma

人上皮細胞總RNAHMEpiC NA茜素黃GG Alizarin yellow GG 584-42-9 25G 通用試劑

CTSL1 Others Mouse 小鼠 CTSL / Cathepsin-L 人細胞裂解液 (陽性對照) 馬尿醋;本酰安基醋;本酰甘安醋 Hippuric ccid;Bqnzoyl-cMino ccqtic ccid;N-Bqnzoylglycinq;Bqnzoylglycocoll 492-69-

HCT-15 人細胞MaltosemonohydrateD-(+)-麥芽糖單水合物0.1UN超，99%

CL-0401NCI-H446(人小細胞細胞)5×106cells/瓶×214936-97-1藍I鈉鹽XYLIDYL BLUE I wo7ium SALT
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。