技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

特點優勢：
1. 特異性：擠奶工毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
CL-0101Hela(人細胞)5×106cells/瓶×22-壬醇250毫克保存：-20℃

WI-38細胞，人二倍體細胞系 人EBV陽性B瘤細胞,P3HR1細胞 615小鼠樹突狀細胞瘤株;DCS4 4-(六拂異亞炳基)二本安 98% 2,2-Bis(4-cminophqnyl)hqxcfluoropropcnq 1092-78-9

Bcap-37(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2重酸100克

CTSL1 Others Human 人 CTSL1 / Cathepsin-L1 人細胞裂解液 (陽性對照) BigCHAP(3a,5b,7a,12a)-N,N-雙[3-(D-葡萄糖酰基)基]-3,7,12-三羥基膽甾烷-24-胺5克SP，98%

急性T細胞細胞;TALL-10450-69-1D(-)核糖(+4℃)D-Ribose
GP120 Others HIV 人類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp120 / SU 人細胞裂解液 (陽性對照) 硬脂酸甲酯(>99.5%(GC),標準物質)Methyl Stearate質量規格：>99.5%(GC),標準物質

中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24亞麻酸甲酯(>98.0%(GC),標準物質)Methyl Linolenate質量規格：>98.0%(GC),標準物質

EDAR Others Cynomolgus 食蟹猴 EDAR 人細胞裂解液 (陽性對照) 亞油酸甲酯(>99.0%(GC)，標準物質)Methyl Linoleate質量規格：>99.0%(GC)，標準物質

頜下腺上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1-十一1(>99.5%(GC),標準物質)1-Undecene質量規格：>99.5%(GC),標準物質

P3HR1細胞，人EBV陽性B瘤細胞 大鼠細胞株,DSL-6A/C1細胞 人小腦星形膠質細胞cDNAHA-c cDNA1-十二1(>99.5%(GC),標準物質)1-Dodecene 質量規格：>99.5%(GC),標準物質
擠奶工毒PCR檢測試劑盒說明書QGY-7701(人細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 EphA3 人細胞裂解液 (陽性對照) 醋酸組氨瑞林 Histrelin Acetate質量規格：BR,度>98%

人結直腸腺癌細胞;COLO 205青霉素V鉀Penicillin V potassium salt質量規格：1440~1680 U/mg,BR

CD47 Others Human 人 CD47 人細胞裂解液 (陽性對照) 2'-脫氧肌苷2'-deoxyinosine質量規格：>98%,BR

mEPC, 小鼠內皮祖細胞-骨髓鹽酸尼非卡蘭Nifekalant hydrochloride質量規格：>98%,BR

3T3TK細胞，小鼠成纖維細胞 TNFa轉染耐VP16絨癌細胞,JEG-3-VP16-TNFa細胞 人滑膜細胞RNAHS miRNA5 μg鹽酸尼非卡蘭(標準品)Nifekalant hydrochloride質量規格：HPLC>99%,標準品
EGFL7 Protein Human 重組人 EGFL7 / VE-statin 蛋白 (His 標簽)HCTISSUEFIXATIVE100/CS組織固定劑組織學級30MLRT

WL1(大鼠肺細胞) 5×106cells/瓶×2 原代肝實質細胞特制基礎培養基Many types of cells包裝：500/250/100ml硼醋 Boric ccid (cS);Borofcx 10043-32-3

人肺動脈平滑肌細胞總RNAHPASMC NABOC-L-TryptophanN-叔丁氧羰基-L-色酸10克BR，99%

PLA2G2E Others Mouse 小鼠 PLA2G2E 人細胞裂解液 (陽性對照) LACTOSE乳糖美國國家處方級 50KG

U973 人細胞(新霉素)