PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

22-Dehydroclerosteryl acetate  28594-00-5  中文名：  分子式：C31H48O2  度：93.0%  關鍵詞：  大葉桂櫻; 豆甾烷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠琥珀酸脫氫酶elisa試劑盒   小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠琥珀酸脫氫酶試劑盒、小鼠琥珀酸脫氫酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

22-Dehydroclerosterol glucoside  143815-99-0  中文名：  分子式：C35H56O6  度：%  關鍵詞：  ; 豆甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原elisa試劑盒   大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原試劑盒   規格型號：96T/48T   大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原試劑盒、大鼠凝血因子Ⅷ相關抗原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

22-Dehydroclerosterol  26315-07-1  中文名：22-去氫赤桐甾醇  分子式：C29H46O  度：94.0%  關鍵詞：  抗菌; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  大鼠凝血酶抗凝血酶復合物elisa試劑盒   大鼠凝血酶抗凝血酶復合物試劑盒   規格型號：96T/48T   大鼠凝血酶抗凝血酶復合物試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：大鼠凝血酶抗凝血酶復合物試劑盒、大鼠凝血酶抗凝血酶復合物eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

21-Deoxyneridienone B  924910-83-8  中文名：  分子式：C21H28O3  度：%  關鍵詞：  孕甾烷; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體elisa試劑盒   大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒   規格型號：96T/48T   大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體試劑盒、大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

20-Hydroxyecdysone  5289-74-7  中文名：20-羥基蛻皮甾酮  分子式：C27H44O7  度：98.0%  關鍵詞：  ; ; ; 蛻皮甾; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠呼腸孤病毒3型抗體（RV-3Ab）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
sVE-Cadherin   作用：   ELISA   規格：   96T   奧地利 Bender  Otophylloside F  中文名：青陽參苷F  分子式：C48H76O16 

Borate,Decahydrate   500g                 4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane  中文名：  分子式：C11H11NO2 

Bite   1kg  4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester  188742-80-5  中文名：4,5-二咖啡酰奎寧酸甲酯  分子式：C26H26O12 

SOD   3KU                 Amoxicillin  中文名：阿莫西林  分子式：C16H19N3O5S 

Skimmilk   500g  Amoxicillin trihydrate  61336-70-7  中文名：羥氨芐青霉素三水合物  分子式：C16H19N3O5S
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒供應大鼠源細胞 Butt's 瘤細胞，NAMALWA細胞 LLC-MK2細胞，綠猴恒河猴腎細胞咪唑煙酸(標準品)質量規格：HPLC>99%,標準品Imazapyr acid

Hela, 人細胞系 Human石膽酸(標準品)質量規格：>97(GC),標準品Lithocholic Acid

ADIPOQ Others Mouse 小鼠 ADIPOQ / ACDC / Adiponectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧嗪酸鉀質量規格：>98%Potassium Oxonate

鐵硒傳遞蛋白 100xITS氧嗪酸鉀(標準品)質量規格：>98%,標準品Potassium Oxonate

ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照) 綿馬酸ABA（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Filixic acid ABA
人胚肺二倍體細胞;HEL-1 人胃粘膜上皮細胞完全培養基 100mL大豆分離蛋白shēng huà shì jì容量：RT50克

人滑膜細胞RNAHS miRNA5 μg2 2 4 4 5-五溴聯本迷 2,2',4,4',5-PqNTcBROMODIPHqNYL qtqr 60348-60-9

LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬酸shēng huà shì jì容量：5克

牛胚氣管細胞;EB (NBL-4)Φ60mm細胞培養皿shēng huà shì jì容量：2～8℃5克

A172細胞，膠質母細胞瘤細胞 ,HepG2細胞 人結直腸腺癌細胞;COLO 205300-87-83，5-二甲基異唑，97%3,5-Dimetxylisoxazole
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。