PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：諾氏PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

2-Aminophenyl phenyl sulfone  中文名：2-氨基二苯砜  分子式：C12H11NO2S    生成素-2   英文名稱：   Angiopoietin-2   英文縮寫：   ANG2   規格：   48T/96T

2-Aminophenyl phenyl sulfide  中文名：2-氨基二苯硫醚  分子式：C12H11NS    生成素相關生長因子   英文名稱：   Angiopoietin Growth Factors   英文縮寫：   AGF   規格：   48T/96T

2-Aminonicotinic acid  中文名：2-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2    載脂蛋白P   英文名稱：   Apolipoprotein P   英文縮寫：   ApoP   規格：   48T/96T

2-Amino-N-(2-chloro-6-methylphenyl) thiazole-5-carboxamide  中文名：  分子式：C11H10ClN3OS    生成素 -2(Angiopoietin-2)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

2-Aminoisonicotinic acid  中文名：2-氨基異煙酸  分子式：C6H6N2O2    生成素相關生長因子 (AGF)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝
二（MDA）檢測   Malondialdehyde (MDA) detection                 Xanthorin  17526-15-7  中文名：  分子式：C16H12O6 

二（MDA）測定試劑盒（TBA法）  Ranolazine di  95635-56-6  中文名：鹽酸雷諾嗪  分子式：C24H35Cl2N3O4  度：98.0%  關鍵詞： 

鵝特定基因序列(Goose)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Phenformin  114-86-3  中文名：苯乙雙胍  分子式：C10H15N5  度：98.0%  關鍵詞： 

鵝特定基因序列(Goose)核酸檢測試劑盒   48T                 Phenformin  114-86-3  中文名：苯乙雙胍  分子式：C10H15N5 

多功能DNA化回收試劑盒   Multifunctional DNA purification and recycling Kit                 Axitinib  中文名：阿西替尼  分子式：C22H18N4OS
諾氏PCR檢測試劑盒直銷WISH細胞，人羊膜細胞 普通變形桿菌 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6草(>98%,BR)質量規格：>98%，BROxalyldihydrazide

CXCL9 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白惡唑(>96%，BC)質量規格：>96%，BCOxazole

NCI-H292(人細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/1A/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙酸鈀質量規格：BCPalladium (II) acetate

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2氯化鈀質量規格：BCPalladium (II) chloride

ALOX15B Others Human 人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鄰苯二甲腈(>99.0%(GC))質量規格：>99.0%(GC)Phthalonitrile
EPCAM Others Human 人 EpCAM / OP1 人細胞裂解液 (陽性對照) Antipaindixy7nochloride抗痛素100克生物技術級，600u/mg

人肝內膽管上皮細胞總RNAHIBEpiC NA啊匹油脂　L cPIqZON GRqcSq L 1678-0-3

PAK3 Others Human 人 PAK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) Sulforhodaminep磺酰羅丹明B細胞培養試劑染料100毫克BS

中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-IBOVINESERUMALBUMIN,20%SOLUTION牛血清白蛋白溶液生物技術級500MLCOLD

SMC-1細胞，胸膜細胞瘤 早幼粒急性細胞系,HL-60細胞 小鼠子細胞;U14(化瓊脂)
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。