技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：薩比亞病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
4-Benzoyloxy-2-azetidinone  中文名：4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮  分子式：C10H9NO3  度：98.0%  小鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

2,2-Bis(3-amino-4-hydroxyphenyl)hexafluoropropane  中文名：2,2-雙(3-氨基-4-羥苯基)六氟丙烷  分子式：C15H12F6N2O2  度：98.0%  小鼠白三烯B4(LTB4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

4-Benzoyl 4'-methyldiphenyl sulfide  中文名：4-苯甲酰-4'-甲基二苯硫醚  分子式：C20H16OS  度：98.0%  小鼠抑制因子受體(LIFR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

4-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-aspartate  中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-天冬氨酸-4-芐酯  分子式：C16H21NO6  度：98.0%  豬低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

4-Biphenylcarboxylic acid  中文名：4-苯基苯甲酸  分子式：C13H10O2  度：98.0%  豬-葡萄糖共轉(zhuǎn)運(yùn)載體1(SGLT1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3-Benzoylthiazolidine-2-thione  70326-37-3  中文名：3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮  分子式：C10H9NOS2  度：98.0%   

山羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3-Benzoylthiazolidine-2-thione  70326-37-3  中文名：3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮  分子式：C10H9NOS2 

山羊白介素10elisa試劑盒   山羊白介素10試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   山羊白介素10試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：山羊白介素10試劑盒、山羊白介素10 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid  中文名：  分子式：C12H12F2O4 

山羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3-Benzalphthalide  中文名：3-亞芐基苯酞  分子式：C15H10O2  度：98.0%

山羊白介素10(IL-10)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              3-Benzoylthiazolidine-2-thione  中文名：3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮  分子式：C10H9NOS2
薩比亞病毒PCR檢測(cè)試劑盒直銷PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 草酸依地普侖/草酸艾司西酞普蘭（標(biāo)準(zhǔn)品）Escitalopram Oxalate質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性細(xì)胞;RBL-1消旋卡多曲Racecadotril質(zhì)量規(guī)格：>99.5%，EP6.2

BEL-7402細(xì)胞，細(xì)胞 人口腔表皮樣癌細(xì)胞,KB細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2消旋卡多曲（標(biāo)準(zhǔn)品）Racecadotril質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

C57BL/6小鼠T細(xì)胞瘤細(xì)胞;RMA乙酰螺旋霉素Acetylspiramycin質(zhì)量規(guī)格：>1200u/mg,CP2005

CD226 Others Human 人 CD226 / DNAM-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 尼羅替尼Nilotinib質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
小鼠垂體細(xì)胞(MPC)(5×105) 5637, 人細(xì)胞 Humanβ-煙酰腺嘌呤二核苷酸，英文名或英文縮寫：β-DPN，級(jí)別：BR,，250-600u/mg，規(guī)格：25克

獼猴皮膚細(xì)胞;MMS4乙醇氧化酶 Alcohol Oxidase 9073-63-6 250U 通用試劑

CDH5 Others Rat 大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 拂西汀相關(guān)物質(zhì)B Fluoxqtinq Rqlctqd CoMpound B;N-Mqthyl-3-phqnylpropylcMinq 3280-89-4

*真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)TRISTRICINESDS10XREADYPKTris-Tricine-SDS緩沖液粉末包超級(jí)1 PackRT

THP-1細(xì)胞，人單核細(xì)胞細(xì)胞 BALB/C小鼠肝上皮細(xì)胞,BNL1ME A.7R.1細(xì)胞 角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)添加物(不含動(dòng)物成分)KGS-acf硅酮　OV-3SILICONE OV-3