PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：豬病毒價格使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

3,4-O-Isopropylidene shikimic acid  183075-03-8  中文名：  分子式：C10H14O5    Humanphosphoinositide-specificphospholipaseC,PIPLCELISAKit人0酯酰肌醇特異性0酯酶C(PIPLC)ELISA試劑盒規格：96T/48T

3a-Hydroxy-3,3a,7,7a-tetrahydrobenzofuran-2,6-dione  55604-88-1  中文名：  分子式：C8H8O4    兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

1,18-Octadecanediol  3155-43-9  中文名：  分子式：C18H38O2    Human adenovirus IgM (ADV-IgM) ELISA Kit 人腺病毒IgM(ADV-IgM)ELISA試劑盒

1,2-O-Isopropylidene-β-D-fructopyranose  66900-93-4  中文名：  分子式：C9H16O6    Humanai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit 人抗肌內膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

1-Chloro-6-(5-(prop-1-ynyl)thiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  78876-52-5  中文名：  分子式：C13H9ClOS    HumandipeptidylpeptldaseⅣ,DPPⅣELISA試劑盒人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒規格：96T/48T
檸檬酸（CA）含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣              Rizatriptan benzoate  145202-66-0  中文名：苯甲酸利扎曲坦  分子式：C22H25N5O2 

鎳快速測試盒   Nickel rapid test case  Ranitidine  66357-35-5  中文名：雷尼替丁  分子式：C13H22N4O3S  度：98.0%  關鍵詞： 

鎳測試盒   Nickel test case  4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester  中文名：  分子式：C16H16N4O3  度：98.0%

尿酸含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣              Tropisetron   105826-92-4  中文名：鹽酸托烷司瓊  分子式：C17H21ClN2O2 

尿激酶型纖溶酶原激活因子受體 (uPA-R)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝     O-Benzyl-L-tyrosine  16652-64-5  中文名：O-芐基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3
豬病毒價格SW-13(人腎上腺皮質癌細胞) 5×106cells/瓶×2 MCF-7(人癌細胞)曙紅Y,醇溶劑紅 43質量規格：AREosin Y ,alcohol solution

CM-M068小鼠腎小管平滑肌細胞完全培養基100mL曙紅B質量規格：BSEosin B

CD27 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD27 / TNFRSF7 人細胞裂解液 (陽性對照) 蘆丁/蕓香葉苷質量規格：>97%,BRRutin

小氣道上皮細胞培養基SAEpiCM-prf蘆丁/蕓香葉苷(標準品)質量規格：≥98%，標準品Rutin

Hela P10s-11F細胞，人細胞 小鼠神經母細胞瘤細胞與大鼠細胞之融合細胞,NG108-15細胞 平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)新橙皮苷二氫查爾酮質量規格：≥95%,BRNeosperidin dihydrochalcone
視網膜色素上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)茄尼醇（標準品）質量規格：HPLC≥97%，標準品Solanesol

GRK6 Others Human 人 GRK6 / GPRK6 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 大波斯菊苷,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(標準品)質量規格：HPLC≥98%,標準品Apigenin-7-O-β-D-glucopyranoside

tTA基因修飾的小鼠細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3秦皮苷（標準品）質量規格：HPLC≥98%，標準品Fraxin

SH-SY5Y細胞，神經母細胞瘤細胞 人細胞,GBC-SD細胞 CL-0048Ca Ski(人上皮細胞)5×106cells/瓶×2秦皮甲素（標準品）質量規格：≥98%，標準品Esculin

人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株;7WCY1.0氨基三乙酸（標準品）質量規格：供HPLC法雜質檢查用Nitrilotriacetic acid
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。