PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

9,16-Dioxo-10,12,14-octadecatrienoic acid  217810-46-3  中文名：  分子式：C18H26O4    Rat thrombus precursor protein (TpP) ELISA Kit 大鼠前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒

11-Hydroxyjasmonic acid  140447-14-9  中文名：  分子式：C12H18O4    Humanai-glycoproteinaibody,GPELISAKit 人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Soyacerebroside II  115074-93-6  中文名：大豆腦苷II  分子式：C40H75NO9    humandihydropyrimidinase-like3,DPYSL3ELISA試劑盒人二氫嘧啶酶樣3(DPYSL3)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Sucrose  57-50-1  中文名：  分子式：C12H22O11    組織MUSK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

5-Hydroxymethylfurfural  67-47-0  中文名：5-羥甲基糠醛  分子式：C6H6O3    Humanphospholamban,PLNELISAKit人受0蛋白(PLN)ELISA試劑盒規格：96T/48T
兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Amino-1-methyluracil  2434-53-9  中文名：  分子式：C5H7N3O2 

兔子Ⅱ型膠原(ColⅡ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Amino-1,3-dimethyluracil  中文名：  分子式：C6H9N3O2  度：98.0%

兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil  中文名：  分子式：C5H6N4O3  度：98.0%

兔子Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil  6972-78-7  中文名：  分子式：C5H6N4O3  度：98.0%  關鍵詞： 

兔子Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           6-Amino-1-methyl-5-nitrosouracil  中文名：  分子式：C5H6N4O3
念珠狀鏈桿菌PCR檢測試劑盒直銷MDA-MB-157(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2醋酸德舍瑞林質量規格：>99%,BRDeslorelin Acetate

Anglne(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R067大鼠腎足突細胞完全培養基100mL 人胚腎細胞-F克隆;293F去氨加壓素;去氨壓素質量規格：>98%,BR,醋酸鹽形式Desmopressin Acetate

CM-H071人腎動脈平滑肌細胞完全培養基100mL地塞米,氟美（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Dexamethasone

SPHK1 Others Human 人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸地爾硫卓質量規格：>98%,BRDiltiazem HCL

人表皮色素細胞-胎兒HEM-f鹽酸地爾硫卓(標準品)質量規格：含量測定，標準品Diltiazem HCL
SLAMF6 Others Human 人 Ly108 / SLAMF6 人細胞裂解液 (陽性對照) LY2940680質量規格：>98%LY2940680

人滋養層絨毛細胞總RNAHVT NALY2886721 質量規格：>98，BACE1 inhibitorLY-2886721

小鼠神經皮質細胞(MN-c)(1×106)利尼伐尼；ABT869質量規格：>98%，VEGFR/PDGFR抑制劑 Linifanib (ABT-869)

家貓皮膚細胞;FCA-S1頭孢匹林鈉(標準品)質量規格：含量測定Cefapirin

小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32 小鼠成年表皮角質形成層細胞完全培養基 100mLL-赤-鞘氨醇(合成物)質量規格：美國進口L-erythro-Sphingosine (synthetic)
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。