PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：潰蝕齒密螺旋體PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Atractylodin  中文名：蒼術(shù)素  分子式：C13H10O    紅細(xì)胞NADH高鐵血紅蛋白還原酶測定試劑盒（比色法）

Atorvastatin calcium  中文名：阿托伐他汀鈣  分子式：C33H35FN2O5    銅－ATP酶（Cu-ATPase）測定試劑盒（比色法）                 

Aspirin  中文名：阿司匹林  分子式：C9H8O4    總谷胱甘肽（T-GSH）/氧化型谷胱甘肽（GSSG）測定試劑盒（微板法）

Aspergillon A  中文名：  分子式：C22H32O    酸性0酸酶（ACP）測定試劑盒（微板法）

Aspartame  中文名：阿司帕坦  分子式：C14H18N2O5    抗酸性0酸酶（SACP）試劑盒（比色法）
豚鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒 ，英文名： CRP ELISA Kit  2,4-Dihydroxypyridine  626-03-9  中文名：  分子式：C5H5NO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

豚鼠Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原(KL-6)ELISA試劑盒 ，英文名： KL-6 ELISA Kit  2,4-Bis(α,α-dimethylbenzyl)phenol  中文名：2,4-雙(α,α-二甲基苯甲基)*  分子式：C24H26O  度：98.0%

豚鼠25羥基維生素D3(25 HVD3)ELISA試劑盒 ，英文名： 25 HVD3 ELISA Kit  2',3'-Di-O-acetyl-5'-deoxy-5-fluorocytidine  161599-46-8  中文名：  分子式：C13H16FN3O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔組織因子途徑抑制物elisa試劑盒   兔組織因子途徑抑制物試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔組織因子途徑抑制物試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔組織因子途徑抑制物試劑盒、兔組織因子途徑抑制物eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Allopurinol  315-30-0  中文名：別嘌醇  分子式：C5H4N4O 

兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Allyl cinnamate  1866-31-5  中文名：肉桂酸烯丙酯  分子式：C12H12O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
潰蝕齒密螺旋體PCR檢測試劑盒說明書IL17A Protein Canine 重組狗 IL17 / IL17A 蛋白奧氮平質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Olanzapine

人神經(jīng)細(xì)胞(HN) (10×106 ) 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) MGC80-3(MGC-803)人細(xì)胞奧氮平（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Olanzapine

CM-R001大鼠肺微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL美伐他汀,康百汀質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Mevastatin

SELL Others Cynomolgus 食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 美伐他汀(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>95%,標(biāo)準(zhǔn)品，用于含量測定Mevastatin

人微內(nèi)皮細(xì)胞HCMEC6-氨基青霉烷酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR6-Aminopenicillanic acid
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0901 人真皮上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL富馬酸氯馬斯汀（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC含量測定Clemastine fumarate

髓核細(xì)胞培養(yǎng)基NPCM富馬酸氯馬斯汀質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRClemastine fumarate

CST1 Others Human 人 CST1 / Cystatin-1 / Cystatin-SN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 富馬酸酮替芬（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測定Ketotifen fumarate

GPH4 豚鼠心肌來源細(xì)胞己內(nèi)酰胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供檢查用2-Oxohexamethylenimine

CM-M014小鼠氣管和上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL百蕊草素I；山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷；阿福豆苷(標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Kaempferol-3-O-glucorhamnoside
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。