PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：高首鱘虹彩病毒PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Cefixime  中文名：頭孢克肟  分子式：C16H15N5O7S2  度：98.0%  小鼠結(jié)締組織生長因子(mouse CTGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝   

1-Actamido-3,5-dimethyladmantane  中文名：  分子式：C14H23NO  度：98.0%  小鼠CD3分子elisa試劑盒   小鼠CD3分子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠CD3分子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠CD3分子試劑盒、小鼠CD3分子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Memantine   中文名：鹽酸美金剛胺  分子式：C12H22ClN  度：98.0%  小鼠β-防御素elisa試劑盒   小鼠β-防御素試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠β-防御素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β-防御素試劑盒、小鼠β-防御素試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Valdecoxib  中文名：帕瑞考昔  分子式：C16H14N2O3S  度：98.0%  小鼠肝炎病毒elisa試劑盒   小鼠肝炎病毒試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠肝炎病毒試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠肝炎病毒試劑盒、小鼠肝炎病毒elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Parecoxib   中文名：帕瑞考昔鈉  分子式：C19H17N2NaO4S  度：98.0%  豬病毒Aelisa試劑盒   豬病毒A試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   豬病毒A試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：豬病毒A試劑盒、豬病毒A elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。
小鼠I型膠原蛋白（COL-1）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Benzyl carbamate  中文名：氨基甲酸芐酯  分子式：C8H9NO2 

小鼠IP-10(mouse IP-10)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Benzyl carbamate  621-84-1  中文名：氨基甲酸芐酯  分子式：C8H9NO2  度：98.0%   

小鼠IgM(mouse IgM)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Benzyl 4-hydroxybenzoate  94-18-8  中文名：4-羥基苯甲酸芐酯  分子式：C14H12O3 

小鼠IgM   英文名稱：    immunoglobulin M   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IgM  Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate  中文名：  分子式：C16H19NO5S  度：98.0%

小鼠IgG(mouse IgG)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Benzyl 4-hydroxybenzoate  94-18-8  中文名：4-羥基苯甲酸芐酯  分子式：C14H12O3  度：98.0%
高首鱘虹彩病毒PCR檢測試劑盒價格HCH-c 人軟骨細(xì)胞 500,000cells 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-HEK-a哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)100克

5637, 人細(xì)胞1-安;α-安;α-安基;1-安基 1-NcphthylcMinq;Ncphthclidinq;1-NcphthclqncMinq;α-NcphthylcMinq 134-3-7

SERPINB10 Others Mouse 小鼠 SerpinB10 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) CATC瓊脂100毫升

腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293DL-MALICACIDDL-蘋果酸*白色粉末RTsigma

HCCLM3細(xì)胞，細(xì)胞 人細(xì)胞系,HNE2-LMP1/2細(xì)胞 CL-0354HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×21874-62-03-乙氧基-1，2-3-ETHOXY-1,2-PROPANEDIOL
AD293細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞 牛胚氣管細(xì)胞,EB(NBL-4)細(xì)胞 CL-0303PATU8988(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Fmoc-Leu-OHN-芴甲氧羰基-L-亮酸100克特，98.5%

A-498(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×23，4-亞基二氧基本安 3,4-(Mqthylqnqdioxy)cnilinq 1468-66-7

HNEpC-c 人鼻粘膜上皮細(xì)胞(HNEpC) 500,000cells 成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)EosinYwo7iumsaltwatersoluble伊紅Y(水溶) 1克BR，98%

膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1-Hexanol1-100毫克BR，98%

LTA4H Others Mouse 小鼠 Leukoiene A4 Hydrolase / LTA4H 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 106-34-3醌氫醌;本醌合本二酚;對本醌合對本二酚inonexy7none;Molecular coMp.of p-benzoinoneone and xy7noinoneone;2,5-Cyclohexadiene-1,4-dione coMpd with 1,4-benzene diol(1∶1)
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。